NIBSC 09/260 EB病毒核酸擴(kuò)增技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)品

1. 預(yù)期用途

第一個(gè) WHO 愛潑斯坦-巴爾病毒 (EBV) 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，NIBSC 代碼 09/260，旨在用于基于核酸擴(kuò)增技術(shù) (NAT) 的 EBV 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化。該參考文獻(xiàn)包括在包含 Tris-HCl、人血清白蛋白 (HSA) 和海藻糖的通用緩沖液中配制的 EBV B95-8 毒株（1 型）的完整病毒制劑。該材料已以 1 mL 等分試樣凍干并儲(chǔ)存在 -20 °C。該材料在一項(xiàng)全球合作研究中進(jìn)行了評(píng)估，該研究涉及 28 個(gè)實(shí)驗(yàn)室，對(duì) EBV 進(jìn)行一系列基于 NAT 的檢測(cè) 。

2. 注意
NIBSC 09/260 EB病毒核酸擴(kuò)增技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)品 不適用于人類食物鏈中的人類或動(dòng)物。

該制劑含有人類來源的材料，最終產(chǎn)品或從中提取的原材料都經(jīng)過測(cè)試，發(fā)現(xiàn) HBsAg、抗 HIV 和 HCV RNA 呈陰性。與所有生物來源的材料一樣，這種制劑應(yīng)被視為對(duì)健康有潛在危害。它應(yīng)該被使用和丟棄根據(jù)您自己實(shí)驗(yàn)室的安全程序。此類安全程序應(yīng)包括戴防護(hù)手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎，以免割傷。

3. 單元

該材料已被規(guī)定為 5x106 國(guó)際濃度

根據(jù)一項(xiàng)全球合作研究的結(jié)果，在 1 mL 無核酸酶水中復(fù)溶時(shí)的單位 (IU)。

不確定性：分配的單元不帶有與其校準(zhǔn)相關(guān)的不確定性。因此，不確定性可以被認(rèn)為是小瓶?jī)?nèi)容物的變化，并被確定為 +/- 0.23%。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國(guó)：英國(guó)。

每個(gè)小瓶在 10 mM Tris 緩沖液 (pH7.4)、0.5% HSA 和 0.1% 海藻糖中含有相當(dāng)于 1 mL EBV B95-8 菌株（1 型）的凍干當(dāng)量。

5. 存儲(chǔ)

凍干標(biāo)準(zhǔn)品小瓶應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C。

請(qǐng)注意：由于凍干材料固有的穩(wěn)定性，NIBSC 可能會(huì)在環(huán)境溫度下運(yùn)輸這些材料。

6. 開瓶指南

NIBSC 09/260 EB病毒核酸擴(kuò)增技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)品  小瓶有螺帽；也可能存在內(nèi)部塞子。應(yīng)通過逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)取下蓋子。應(yīng)注意防止內(nèi)容物丟失。請(qǐng)注意：如果在取下瓶蓋時(shí)有塞子，塞子應(yīng)留在小瓶中或隨瓶蓋一起取下。

7. 材料的使用

在重新配制之前，不應(yīng)嘗試稱量?jī)龈刹牧系娜魏尾糠?/span>

內(nèi)容物應(yīng)用 1 mL 去離子、無核酸酶的分子級(jí)水復(fù)溶，并在使用前不時(shí)攪拌至少 20 分鐘。重組材料的最終濃度為 5x106 IU/mL。

國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于校準(zhǔn)二級(jí)參考物質(zhì)，例如，通過根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)平行確定要校準(zhǔn)的二級(jí)參考試劑的等效濃度。然后可以根據(jù) IU 為二級(jí)參考試劑規(guī)定濃度。復(fù)溶后，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)在適合被校準(zhǔn)材料的基質(zhì)中稀釋，并應(yīng)在 EBV DNA 測(cè)量之前進(jìn)行提取。世衛(wèi)組織國(guó)際合作研究表明，09/260 對(duì)標(biāo)準(zhǔn)化包含無細(xì)胞病毒的樣本的檢測(cè)結(jié)果最為有效。 09/260 還改善了包含細(xì)胞相關(guān)病毒的樣品的測(cè)定結(jié)果的實(shí)驗(yàn)室間變異性，但這種改善不如無細(xì)胞病毒樣品 [3] 顯著。 09/260 的用戶還應(yīng)記住，與 NAT 測(cè)定中的 09/260 相比，細(xì)胞相關(guān)病毒 DNA 的甲基化可能會(huì)導(dǎo)致人為降低檢測(cè)。