NIBSC 13/126 流感抗B(標(biāo)準(zhǔn)品)

1. 預(yù)期用途

流感抗血清試劑 13/126 使用適當(dāng)?shù)?NIBSC 抗原試劑制備用于 B/Brisbane/60/2008 抗原的單次徑向擴散測定。

抗血清試劑在綿羊 571 和 578 中制備為 B/布里斯班/60/2008 病毒的純化 HA。HA 抗原通過菠蘿.蛋白酶處理從純化病毒中提取，并通過蔗糖梯度（Brand、CN 和 Skehel， JJ，自然，新生物學(xué)，1972、238、145-147。

2. 注意

NIBSC 13/126 流感抗B(標(biāo)準(zhǔn)品) 不適用于人類或動物人類食物鏈。

該材料不是人或牛來源。與所有生物來源的材料一樣，這種制劑應(yīng)被視為對健康有潛在危害。應(yīng)根據(jù)您自己實驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應(yīng)包括戴防護手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時應(yīng)小心謹(jǐn)慎，以免割傷。

3. 單元

沒有為該材料分配單元。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國：英國。

綿羊的免疫計劃如下：

綿羊 571;肌肉注射一劑約 50 µg B/Brisbane/60/2008 HA 和弗氏*佐劑 (FCA)，兩周后服用 10 微克劑量的弗氏不*佐劑 (FIA)。每周間隔給予包括 FIA 在內(nèi)的另外三劑 10 微克劑量的 B/布里斯班/60/2008。初次免疫后六周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。綿羊 578;肌肉注射一劑約 50 µg B/Brisbane/60/2008 HA 和弗氏*佐劑 (FCA)，兩周后服用 10 微克劑量的弗氏不*佐劑 (FIA)。每周間隔再給予七次 10 微克劑量的 B/布里斯班/60/2008，包括 FIA。初次免疫后十周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。然后通過 APHIS 批準(zhǔn)的滅活 FMDV 方法處理兩種綿羊血清。使用的處理方法是維持 pH5.5 或更低至少 30 分鐘。收集血清，然后用含有NaN3 (0.05% w/v) 的 PBS 緩沖液 1:3 稀釋，并裝入 2ml 體積的小瓶中。

5. 存儲

NIBSC 13/126 流感抗B(標(biāo)準(zhǔn)品)  推薦的儲存溫度為+2-8oC。但是，如果打算長期儲存試劑，即 > 2 年，則可以將它們儲存在 -20°C。抗血清可以冷凍和解凍，對 SRD 測定的使用沒有任何不利影響。

6. 開瓶指南

小瓶有螺帽；也可能存在內(nèi)部塞子。應(yīng)通過逆時針旋轉(zhuǎn)取下蓋子。應(yīng)注意防止內(nèi)容物丟失。請注意：如果在取下瓶蓋時有塞子，塞子應(yīng)留在小瓶中或隨瓶蓋一起取下。

7. 材料的使用

對于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的測定，應(yīng)將 18--22μl 未稀釋的試劑添加到 1ml 瓊脂糖中?？赡苄枰鶕?jù)當(dāng)?shù)貙嶒炇覘l件改變抗血清濃度