NIBSC 16/182 流感抗-A(標準品)

1. 預期用途

流感抗血清試劑 16/182 使用適當的 NIBSC 抗原試劑制備用于 A/Hong Kong/4801/2014 樣抗原的單次徑向擴散測定。使用 A/Hong Kong/4801/2014 樣病毒的純化 HA 在綿羊 652、653、656 和 657 中制備抗血清試劑。通過用菠蘿蛋白酶處理從純化的病毒中提取 HA 抗原并通過在蔗糖梯度上沉降來純化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。

2. 注意

NIBSC 16/182 流感抗-A(標準品) 不適用于人類或動物人類食物鏈。

該材料不是人或牛來源。與所有生物來源的材料一樣，這種制劑應被視為對健康有潛在危害。應根據您自己實驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應包括戴防護手套和避免產生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時應小心謹慎，以免割傷。

3. 單元

沒有為該材料分配單元。

4. 內容

生物材料原產國：英國。

綿羊 652 的免疫計劃如下：肌肉注射一劑約 50 µg A/Hong Kong/4801/2014 樣病毒 NYMCX-263B HA 和弗氏*佐劑 (FCA)，兩周后用 10微克劑量的 NYMCX-263B HA，包括弗氏不*佐劑 (FIA)。每周間隔給予另外三劑 10 微克劑量的 NYMCX-263B HA，包括 FIA。初次免疫后六周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。

綿羊 653、656 和 657 的免疫計劃如下：

肌肉內給予一劑約 50 µg A/Hong Kong/4801/2014 樣病毒 NYMCX-263B HA 和 FCA，兩周后給予 10 微克劑量的 NYMCX-263B HA，包括 FIA。每周間隔給予五次 10 微克劑量的 NYMCX-263B HA，包括 FIA。初次免疫后八周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。然后通過 APHIS 批準的滅活 FMDV 方法處理所有血清。收集血清，然后用含有NaN3 (0.05% w/v) 的 PBS 緩沖液 1:4 稀釋，過濾并裝入 2ml 體積的小瓶中。

5. 存儲

推薦的儲存溫度為+2-8oC。但是，如果打算長期儲存試劑，即 > 2 年，則可以將它們儲存在 -20°C。抗血清可以冷凍和解凍對 SRD 測定的使用沒有任何不利影響

6. 開瓶指南

NIBSC 16/182 流感抗-A(標準品) 小瓶有螺帽；也可能存在內部塞子。應通過逆時針旋轉取下蓋子。應注意防止內容物丟失。請注意：如果在取下瓶蓋時有塞子，塞子應留在小瓶中或隨瓶蓋一起取下。

7. 材料的使用

對于 1ml 中含有 20-50μg HA 活性的抗原的測定，應將 15μl-25μl 未稀釋的試劑加入 1ml 瓊脂糖中。根據使用的 A/Hong Kong/4801/2014 樣抗原標準或根據當地實驗室條件，可能需要更改抗血清濃度。