SRM927f牛血清白蛋白(美國nist標(biāo)準(zhǔn)品)

SRM927f牛血清白蛋白(美國nist標(biāo)準(zhǔn)品)主要用于對總血清蛋白臨床分析中使用的程序進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，對這些程序中使用的日常工作標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行嚴(yán)格評估，并作為比色法測定總蛋白的參考標(biāo)準(zhǔn)方法。此 SRM 是已知蛋白質(zhì)濃度和純度的溶液（質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為 7%）。

SRM 927f 由 10 個(gè)安瓿組成，每個(gè)安瓿含有大約 2.2 mL 的溶液。

該 SRM 的總蛋白質(zhì)含量是使用縮二脲參考方法 [1] 測定的，推薦用于標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室制備的蛋白質(zhì)溶液和“正常"血清池。然后可以使用這種標(biāo)準(zhǔn)化的“正常"血清來校準(zhǔn)折射計(jì)或其他用于血清蛋白估計(jì)的儀器。 SRM 927f 牛血清白蛋白（7 % 溶液）  標(biāo)準(zhǔn)品 還可用于其他程序，例如凝膠擴(kuò)散、氨基酸分析、電泳、氮測定或其他需要充分表征的蛋白質(zhì)進(jìn)行校準(zhǔn)或評估的測試。牛血清白蛋白 (BSA) 濃度的測量使用兩種獨(dú)立的方法，包括氨基酸分析和縮二脲法。兩種方法的結(jié)果報(bào)告如下：1）通過氨基酸分析證明的 BSA 濃度和 2）通過縮二脲法得到的參考 BSA 濃度。

SRM927f牛血清白蛋白(美國nist標(biāo)準(zhǔn)品)由 Equitech-Bio, Inc. (Kerrville, TX) 制備和包裝。源牛血清是在美國在美國農(nóng)業(yè)部注冊的機(jī)構(gòu)生產(chǎn)的，僅用于制造用于體外診斷、研究和進(jìn)一步制造或技術(shù)目的的產(chǎn)品。使用 0.02 mol/L 氯化鈉將該 SRM 的 BSA 從 30% BSA 商業(yè)庫存（Equitech-Bio, Inc., Kerrville, TX）稀釋至約 7%，并使用*將 pH 值調(diào)節(jié)至 6.5 至 6.8。通過膜過濾對材料進(jìn)行滅菌，放入無菌玻璃氬氣沖洗安瓿中并火焰密封。

SRM 927f 價(jià)值分配中的所有分析均在 NIST 進(jìn)行。通過氨基酸分析 (ID-LC/MS/MS) 測量 BSA 濃度：氨基酸分析方法涉及同位素稀釋液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜 (ID-LC/MS/MS) [3]。稀釋 SRM 927f 和 SRM 927e（作為對照）的未衍生樣品，然后與苯丙氨酸、脯氨酸、異亮氨酸、亮氨酸和纈氨酸的穩(wěn)定同位素標(biāo)記類似物混合，然后用液相鹽酸 (HCl) 水解 48 小時(shí)在大約 130 oC 的密封壓力容器中。水解后，將樣品凍干，然后用 0.1 mL/L 甲酸水溶液復(fù)溶。在嵌入酸性離子對基團(tuán)的反相分析柱上使用梯度洗脫混合模式色譜法分離氨基酸。在三重四極桿質(zhì)譜儀上進(jìn)行測量，監(jiān)測每種氨基酸的特定躍遷。

通過氨基酸分析確定的 BSA 認(rèn)證濃度值在表 1 中提供。 NIST 認(rèn)證值是 NIST 對其準(zhǔn)確性的最高置信度的值，因?yàn)樗幸阎蚩梢傻钠顏碓炊家驯慌懦?。調(diào)查或分析[2]。 BSA 濃度的認(rèn)證值基于同位素稀釋液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜 (ID-LC/MS/MS) [3] 的結(jié)果。

使用縮二脲法測定的參考 BSA 濃度見表 2。使用縮二脲參考法 [1] 測定 SRM 927f 中的 BSA 濃度，使用 SRM 927e 作為外標(biāo)。參考值是非認(rèn)證值，是基于真實(shí)值的最佳估計(jì)可用數(shù)據(jù)；然而，這些值不符合 NIST 的認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)，并且提供了相關(guān)的不確定性，這些不確定性可能僅反映測量精度，可能不包括所有不確定性來源，或者可能反映多種分析方法之間缺乏足夠的統(tǒng)計(jì)一致性 [2]。表 3 中提供了其他特性的參考值，包括使用電噴霧電離質(zhì)譜法測定的密度和相對平均分子量。

SRM927f牛血清白蛋白(美國nist標(biāo)準(zhǔn)品) 僅供研究使用。用于制備 SRM 927f 牛血清白蛋白（7% 溶液）的血液采集自美國的牛。僅使用已通過美國農(nóng)業(yè)部 (USDA) 食品安全檢驗(yàn)局 (FSIS) 檢查的牛/尸體的血液。該材料并非來自牛群中出現(xiàn)牛海綿狀腦病 (BSE) 病例的牛，并且該產(chǎn)品不包含且并非源自委員會第 97 號決定中定義的特定風(fēng)險(xiǎn)材料/ 534/EC。沒有使用來自結(jié)核病和/或布魯氏菌病反應(yīng)器的牛血。

SRM 927f 牛血清白蛋白（7 % 溶液）標(biāo)準(zhǔn)品以密封安瓿瓶形式提供給用戶。 SRM 應(yīng)存放在溫度介于 2 °C 和 8 °C 之間的冰箱中。安瓿不應(yīng)冷凍，因?yàn)樵诮鈨鲞^程中安瓿可能會破裂。一旦打開安瓿瓶，應(yīng)立即使用該溶液。打開的安瓿瓶中任何未使用的溶液都應(yīng)丟棄。較低濃度的蛋白質(zhì)溶液可以通過轉(zhuǎn)移適當(dāng)?shù)姆盅b到容量瓶中并稀釋至刻度。 SRM 不提供稀釋劑；可以使用氯化鈉水溶液稀釋劑，例如濃度為0.15mol/L的溶液。由于蛋白質(zhì)損失的可能性（可能是由于實(shí)驗(yàn)室設(shè)備上的蛋白質(zhì)吸收），在進(jìn)行超過 100 倍的稀釋時(shí)應(yīng)小心。

不當(dāng)使用：此 SRM 不打算用作染料結(jié)合測試的標(biāo)準(zhǔn)，因?yàn)?BSA 的染料結(jié)合特性可能與其他被檢測的蛋白質(zhì)不同。此外，此 SRM 不適用于檢查預(yù)先校準(zhǔn)的折射計(jì)、免疫化學(xué)方法或作為膽紅素標(biāo)準(zhǔn)化的添加劑。