NIBSC 20/138標準品SARS-CoV-2 RNA簡介

NIBSC 20/138標準品SARS-CoV-2 RNA包含嵌合慢病毒顆粒 (LVP)，其中人類免疫缺陷病毒 (HIV-1) 基因已被武漢一號 SARSCoV-2 分離株的基因取代。在世衛組織國際合作研究中，該制劑與世衛組織 SARS-CoV-2 RNA 國際標準同時進行了評估 (1)。工作試劑的預期用途是作為檢測 SARS-CoV-2 RNA 的核酸擴增技術 (NAT) 檢測中的二級標準或陽性對照。

NIBSC 20/138標準品SARS-CoV-2 RNA作為建立 WHO SARSCoV-2 RNA 國際標準（NIBSC 目錄號 20/146）的合作研究的一部分進行了校準，發現其單位為 6.73 Log10 IU/mL ，當在 0.5mL 分子級水或 PBS 中復溶時，95% 的置信限為 6.58 至 6.88。

每瓶NIBSC 20/138含有 0.5mL 凍干、非傳染性、合成 SARS-CoV-2 RNA，包裝在 HIV-1 顆粒中。已將單核苷酸突變隨機插入到 SARS-CoV-2 RNA 序列中以防止蛋白質表達，并且通過將 SARS-CoV-2 基因組分成四個重疊片段來制備材料。

嵌合 LVP 在通用緩沖液中等摩爾配制，該緩沖液包含 10 mM Tris-HCl (pH 7.4)、0.5% 人血清白蛋白和 1% D-(+)- 海藻糖脫水物，背景為 1x10^5人類基因組 DNA 的拷貝數/mL。包含 SARS-CoV-2 RNA 的四種嵌合 LVP 的完整共有序列保存在 GenBank 登記號 MW059032、MW059033、MW059034、MW059035 下。

NIBSC 20/138標準品SARS-CoV-2 RNA材料應在 0.5 mL 分子級水或 PBS 中復溶。添加后，安瓿應在環境溫度下放置 20 分鐘，然后混合，避免產生過多的泡沫。重構后，應將 20/138 稀釋到適合所用材料/測定的基質中。

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