CRM-GTX2&3-d 魚腥藻毒素-2 和-3溶液研制方法說明

CRM-GTX2&3-d 魚腥藻毒素-2 和-3溶液的研制

從培養的塔瑪亞歷山大藻(Alexandriumtamarense)中提取N-硫脲基-2和-3，并化學轉化成GTX2和GTX3混合物。純化后的GTX2&3在真空中干燥，溶于過濾后的0.5mm HCI中，形成原液。用500 MHz質子核磁共振(NMR)、LC-OX-FLD[3](圖1)、LC-MS/MS[4](圖2和圖3)、毛細管電泳-紫外檢測(CE-UVD)[5]和液相色譜-化學發光光譜(LC-CLND)[6]對毒素的純度進行了檢測。

CRM-GTX2&3-d 溶液在過濾 (0.2 um) 中制備并在 pH 3.4 下脫氣 0.5 mM HCl，然后分配到預先填充有氬氣的琥珀色安瓿中，然后立即將其火焰密封。每個安瓿含有大約 0.5 mL 溶液 .

分析方法與價值分配

CRM-GTX2&3-d(表1)的標準值是基于NRC使用兩種分析方法得到的結果：1 HNMR(QNMR)，以鄰苯二甲酸氫鉀(NISTSRM 84I)為校準劑的準確溶液和以咖啡.因(NMIA M724c)為準確溶液的LC-CLND。

CRM-GTX283-d中存在低水平的脫阿米諾酰弓形毒素-2(DcGTX2)、脫羧阿米諾酰弓形毒素-3(DcGTX3)、弓形毒素-1(GTX1)和弓形毒素-4(GTX4)。信息值分配給byic-ox-FLD，并使用NRC CRMS對這些類似物進行校準(表2)。

同質性

代表數量的CRM-GTX2&3-d安瓿是從整個填充系列和GTX2&3濃度測定的LC-OX-FLD。數據用方差分析進行評估。

穩定度

研究表明，儲存在+4°C的密封安瓿中的GTX2&3溶液具有良好的長期穩定性，在一年內沒有觀察到可檢測到的分解現象。溶液也是穩定的，當儲存在冰箱(-12°℃或更低)。測定結果表明，GTX283在室溫下具有良好的穩定性，在不確定度范圍內未觀察到一個月的分解現象(LC-MS，<1%RSD；n=6)。

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